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O Sistema Central serotoninérgicos medeia o efeito analgésico da eletroacupuntura em Zusanli Acupoi

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O Sistema Central serotoninérgicos medeia o efeito analgésico da eletroacupuntura em Zusanli Acupoints(ST36)

Fang Chang Chia-uma-Huei Tsai c Yann Yu Chien-Ming Pei Yi Lu-b e Lin-Jaung Geng d a) Laboratório de Neurociências, Departamento de Neurologia, e bDepartment de CooperativeTreatment chineses ocidentais, a China Medical University Hospital, Taichung; · Departamento de Farmacologia, e d) Acupuntura Research Center e Instituto de Ciências Médicas Chinesas, China Medical University, Taichung, e e)Department de Enfermagem, Jen-Te Junior da Faculdade de Medicina, Enfermagem e Gestão, Miaoli, Taiwan / ROC

Palavras-chave Eletroacupuntura ? ? Analgesia Serotonin

Resumo Evidência na última década indicam que os mecanismos de, anti-nocicepção da eletroacupuntura (EAC) envolvem ações de neuropeptídeos (ie, encefalina e endorfina) e monoaminas (ie, serotonina e noradrenalina) no sistema nervoso central. Nossos resultados apresentam usando uma injeção subcutânea de formalina para testar a sensação de dor em camundongos proporcionar mais compreensão do envolvimento da serotonina nas ações do EAC analgesia. Nossas observações mostram que (1) EAc em três freqüências diferentes (2, 10 e 100 Hz) provocou um efeito anti-nociceptivo, conforme determinado pela observação do comportamento de lamber pata reduzida (2); administração exógena intracerebroventricular de 5-hidroxi-triptamina (5-HT) apresentaram um efeito analgésico, que imitou parcialmente a ação analgésica da CAE (3), o anti-nocicepção da EAC em diferentes freqüências foi atenuada após a biossíntese da serotonina reduzida pela administração do inibidor da triptofano hidroxilase, p clorofenilalanina, e (4), o 5-HT1A e antagonistas dos receptores 5-HT3, pindobind-5-HT1A e LY -278584, respectivamente, bloqueou três diferentes freqüências da EAC induzido efeito analgésico, mas o efeito anti nociceptivo de 100 Hz EAc foi potencializado pelo antagonista do receptor 5-HT2, quetanserina. Estas observações sugerem que 5 HTIA e receptores 5-HT3 parcialmente mediar os efeitos analgésicos da CAE, mas que o receptor 5-HT2 é inversamente envolvidos na resposta nociceptiva. Copyright © 2004 Conselho Nacional de Ciência, ROC e S, AG Karger, 8aaeT

Eletroacupuntura (EAC) é uma prática medicinal tradicional chinesa que consiste em fazer passar uma corrente elétrica através de agulhas inseridas em pontos de acupuntura ou pontos de gatilho, ou para aliviar a dor. Embora EAc tem sido amplamente utilizado para aliviar a dor, o mecanismo de analgesia do CAE permanece obscura. Cheng e Pomeranz [6] já a hipótese de que dois mecanismos distintos de alívio da dor estão envolvidos nos efeitos da EAC, incluindo endorfinas endógenas e sistemas não-endorphin. Eles mostraram que o efeito da baixa freqüência EAc é mediada por endorfinas endógenas e os efeitos da alta freqüência EAc não é endorfinérgicos, porque as observações que o antagonista do receptor não-seletivo de opióides, naloxona, cornpletely bloqueou o efeito analgésico induzido pela baixa freqüência EAc estímulos (ie, 4 ou 6 Hz), mas não a ação analgésica induzida por alta freqüência EAC (200 Hz). As ações não-endorfinérgicos podem ser mediados por neurônios mono-aminérgico [5, 30, 32]. Evidências de animal experimentos implica que o EAC é capaz de influenciar a síntese e liberação de serotonina (5-HT) e norepi-adrenalina (NE) no sistema nervoso central (SNC). EAc acelera a expressão gênica de c-fos em neurônios serotonérgicos do núcleo dorsal da rafe, centralis núcleo da rafe, e superior e da medula rostral ventromedial [10, 17]. Além disso, tem sido documentado que o 5-HTB, mas não 5-HT1A, 5-HT2, mas não 5-HT2A, e os receptores 5-HT3 estão envolvidos no EAC-analgesia, enquanto que a ativação de 5-HTIA e 5 - HT2A receptores suprime EAc analgesia induzida [30]. induzida por estímulos EAc alteração do NE concentrações no SNC é variável. Wang et al. [34] relatou que EAc inibe a liberação de NE do núcleo reticular lateral paragiantocellularis, que por sua vez, medeia o efeito anti-nociceptivo. Como sempre, Shen et al. [26] Por outro lado observou-se que as concentrações de NE no córtex, o hipotálamo eo tronco encefálico em prega após estímulos EAC.

Nisto, nós ainda empregou um modelo de dor induzida pela formalina em camundongos e farmacologicamente elucidar o envolvimento dos subtipos de receptores 5-HT no EAC-analgesia. Uma resposta nociceptiva aguda, que foi induzido por uma injeção subcutânea de formalina na parte dorsal da pata e foi representado pela elevação, lambendo, mordendo, apertando ou da pata afetada, foi utilizada como índice de medida para avaliar o grau de "sensação de dor". Formalina induz resposta bifásica, um fase inicial da resposta ocorre imediatamente após a injeção de formol e dura por 5 min; fase tardia da resposta começa a cerca de 20 após a injeção de chuva e continua por 20-30 min [13, 23, 31, 36, 37]. Nós medimos o tempo em que o mouse lambeu sua pata em resposta à injeção de formalina como o índice nociceptivo. Relata que a estimulação EAc reduziu a duração do castigo, indicando que EAc possui um efeito analgésico. analgesia Além disso, nossas observações que o tratamento prévio com os respectivos 5-HTta e antagonistas dos receptores 5-HT3, pindobind-5-HT1A e LY-278584, atenuado EAc induzido sugerem que os efeitos anti-nociceptire da EAC, nas freqüências de 2, 10 e 100 Hz são parcialmente mediada pela 5-HT1A e receptores 5-HT3. Em contraste com a potenciação, do EAC-efeito analgésico induzido pelo antagonista do receptor 5-HT2 ketanserina, sugere que o receptor 5-HT2 contribui para a resposta nociceptiva ao invés de mediar EAc analgesia induzida.

Materiais e Métodos Materiais Todas as soluções estoque foram preparadas em solução salina apirogênica (PFS). Alíquotas destas soluções estoque foram armazenadas a 4 ° C até o uso. As doses exatas das substâncias utilizadas nos diferentes experimentos são apresentados no "Protocolo Experimental 'abaixo. As fontes de substâncias foram os seguintes: 5-hidroxitriptamina HC1 (Sigma, St. Louis, Missouri, E.U.A.), clorofenilalanina p (PCPA, Sigma), pindobind-5-HTla (RBI, Na-tick, Massachusetts, E.U.A. ), quetanserina (RBI), e LY-278584 (RBI). Animais

Camundongos machos ICR (18-25 g; Laboratório Nacional de Melhoramento Animal e Research Center, Taiwan) foram utilizados nos experimentos. Estes ratos foram alojados em gaiolas individuais de gravação, e mantida a 23 ° C + t com uma luz 12:12 horas ciclo: escuro. Comida e água foram à vontade. O procedimento cirúrgico de implantação de uma cânula guia direcionado para o ventrículo lateral foi realizada quando estes animais foram anestesiados com cetamina / xilazina (87/13 rag / kg), também foram injetados com uma tartarato de butorfanol analgésico () e um amplo espectro antibiótico (penicilina benzatina). Os animais foram autorizados a recuperar de sete dias antes do início dos experimentos. A cupoints e EA c Doses Os acupontos utilizados nos experimentos foram os Zusanli bilateral (ST36). Antes de manipulação com EAc, os ratos foram aclimatados a 5 min da retenção diária de uma semana. Os ratos foram mantidos em um tubo de plástico, e os membros posteriores foram fixados como EAc quando é executada. Dois de aço (32 gauge) foram utilizadas agulhas para punção bilateral no acupontos Zusanli de 3-5 mm de profundidade e uma corrente elétrica nas freqüências de 2, 10 e 100 Hz, com um aumento gradual da intensidade do estímulo até 3 mA foi gerada por um Coulbourn E13-65 Stimulator (Coutbourn Instruments, Allentown, Pensilvânia, E.U.A.). A corrente atravessou as agulhas de aço para os acupontos. A administração do atual durou 5 min. Depois de receber EAc, os ratos foram colocado em uma caixa de observação por 25 min seguido pelo teste de formalina. Teste da formalina O tempo de lamber o membro posterior foi contado a cada 5 e chuva medido durante 40 min após a microinjeção subcutânea de 25 gl de uma solução de formalina a 1% na região dorsal do membro posterior do rato. A fase inicial do tempo de reação foi definida como dor 0-5 min após a injeção de formalina, enquanto a fase final foi entre 15 e 40 min após a injeção.

Protocolo Experimental Os animais foram divididos em vários grupos experimentais. O primeiro grupo de camundongos (n = 8) foi usado para testar os efeitos da retenção de 5 min e estímulo acupoint non-nocicepção induzida pela formalina. O não acupontos foram localizados dois centímetros de distância do Zusanli das traseiras membros. O segundo grupo de camundongos (n = 24) foi usada para observar a efeitos de 2, 10 e 100 Hz de manipulações EAc no teste da formalina nas fases precoces e tardias. O terceiro grupo de camundongos (n - 40) foi intracerebroventricularly (ICV), administrado o veículo (PSF) ou 5-HT (3, 10, 30, 100 e 300 gg) 10 chuva antes da injeção de formalina para determinar o efeito analgésico. O quarto grupo de camundongos (n = 24) foi esvaziada de 5-HT pela administração (IP) intraperitoneal de PCPA (200 mg / kg) 10 min antes da manipulação EAc, o tempo lambendo após injeção de formalina foi determinada. O quinto grupo de camundongos (n = 24) foi administrado com o ICV-pindobind 5HTiA (antagonista dos receptores 5-HT1A, 1 gg), quetanserina (antagonista dos receptores 5-HT2, 1 GG), ou LY-278584 (antagonista dos receptores 5-HT3 , 1 gg) 10 chuva antes da EAC para elucidar o envolvimento de receptores serotoninérgicos dos efeitos EAc mediada analgésico. O volume de injeção foram trazidos a 5 gl de injeção ICV e 1 ml para injeção IP. Estatística AnaIyses Todos os valores são apresentados como média + EPM. Student não pareado teste t foi utilizado para comparar as diferenças entre o grupo experimental e grupos de controle. Uma forma de análise de variância (ANOVA) para o tempo lambendo foi utilizado nos grupos experimentais. Se diferenças estatisticamente significativas foram detectadas, as comparações post-hoc de Dunnett foram feitos para determinar quais as condições de manipulação durante a experimentação desviado valores obtidos dos mesmos animais em condições de controle. Um nível de p ~ c _ <0,05 foi considerado como indicando uma diferença estatisticamente significativa entre os resultados experimentação e controle. Resultados Efeitos do sistema de retenção e não-fumadores Acupoint Estimulação Nossos resultados indicam que nem a retenção de 5 de chuva nem de retenção de 5 min + estimulação acupoint não alteradas os comportamentos induzidos durante tanto a fase precoce ou tardia, após injeção de formalina. Os tempos lamber durante a fase inicial após a injeção de formol, após pré-tratamento com retenção de 5 min, e após a manipulação de pré-retenção cinco chuva + estimulação acupoint não foram 75,6 - + 3,5, 73,6 + - 4,5 e 74,2 + 4,1 s, respectivamente. A duração de lamber tempo na fase final foram 120,5 + - 9,8 s após pré-tratamento com o apoio de cinco chuva e 123,2 + 10,2 s após a retenção de 5 min + estimulação acupoint não, que não se afastem das 119,8 + 6,9 s obtidos após a injeção de formalina.

Os efeitos analgésicos da EAC em três diferentes Freqüências A duração do tempo lambendo foram significativamente reduzidos em ambas as fases precoce e tardia de pré-estimulação com EAc em três freqüências diferentes. pré-estimulação com EAc nas freqüências de 2, 10 e 100 Hz reduziu a duração total de lamber o tempo de 73,6 + - 2,1-43,6 + 1,4, 51,3 e 42,6 + 2,9 + 3,0 s, respectivamente, durante a fase inicial (p <0,05 ; fig. 1). Durante a fase final dos tempos lambendo foram reduzidas de 118,7 - 7,9-56,1 + - + 5,1, 63,2 - 4,3 e 59,3 + - + 7,3 s, respectivamente, quando pré-tratadas com estímulos EAc nas freqüências de 2, 10 e 100 Hz (p

Fig. 1. Os efeitos analgésicos exibido por EAc como a redução do tempo de lamber teste da formalina. estímulos EAc dada em três diferentes freqüências de 2, 10 e 100 Hz estatisticamente reduziu a duração do tempo de lamber durante o início de respostas e de fase tardia. O bar aberto indica os valores obtidos de camundongos controle (sem tratamento CAE n = 8) após a injeção de formalina, o bar fechado representa os valores obtidos após pré-tratamento com 2 Hz de EAc antes da injeção de formalina (n = 8), a esquerda eclodiram bar retrata os valores obtidos após pré-tratamento com 10 Hz EAc antes da injeção de formalina (n = 8), ea da direita mostra chocado bar valores obtidos após 100 Hz EAc de pré-tratamento antes da injeção de formalina (n = 8). Todos os valores são apresentados como média - + SEM. * Valores obtidos após pré-tratamento com EAc diferiu estatisticamente daqueles obtidos após a injeção de formalina apenas (p <0,05).

Efeitos da Administração Central do 5-HT na Analgesia ICV administração de 5-HT em ratos reduziu a formalina induziu respostas nociceptivas em ambas as fases precoce e tardia. Redução do tempo lambendo na fase inicial foi observada a ocorrência de uma forma dose-dependente após a administração ICV de 5-HT, apesar de apenas uma dose maior (300 gg) de 5-HT conseguiu uma redução estatisticamente significante na fase tardia de resposta . Licking tempo na fase inicial foi reduzido de 39,8 + - 1,9 s após a administração do veículo (PFS) de 5,7 t + 2,0, 10,3 + 2,0 e + 1,9 s t2.6 após a administração ICV de 30, 100 gg e 300, de 5-HT, respectivamente (p <0,05; fig. 2). Além disso, o tempo lambendo na fase final foi reduzida de 50,6 - + 4,3 s após a administração de veículo (PFS) para 26,1 - + 4,5 s após a administração ICV de 300 Gg de 5-HT (p <0,05; fig. 2).

Fig. 2. Redução na resposta nociceptiva induzida pela formalina, tanto na fase precoce e respostas tardio, após a administração ICV de 5-HT em ratos. O bar aberto representa valores de lamber o tempo obtido após a injeção de formalina, eo segundo para representar as barras de sexta pré-injeção de 5-HT, em doses de 3, 10, 30, 100 e 300 gg, respectivamente (n = 8 para cada administração de uma dose). Durações de lamber tempo são representados como a média - + SEM. * Valores obtidos após pré-tratamento ICV de 5-HT diferiram estatisticamente daqueles obtidos a partir da injeção tbrmalin apenas (p <0,05).

Efeitos da depleção da 5-HT na Analgesia Induzida EAc IP administração de 200 mg / kg PCPA em ratos obstruiu o EAC-induzida efeito analgésico na fase inicial do teste de formalina, enquanto a nocicepção efeito sinérgico oanti foi observada durante a fase tardia (fig. 3).

Envolvimento dos receptores serotoninérgicos na analgesia EAc Induzida A redução EAC-induzida em lamber tempo foi atenuado pelo ICV ated administração de uma NIST 5-HT1A receptor antagonista (pindobind-5-HTtA, fig. 4, painel superior) ou por um antagonista dos receptores 5-HT3 (LY-278584), durante ambas as fases precoce e tardia do teste de formalina (fig. 4, painel inferior). Em contrapartida, o antagonista dos receptores 5-HT2, quetanserina poten ciou o EAC-induzida diminuição de lamber tempo (fig. 4 painel do meio).

Fig. 3. Efeitos do pré-tratamento com PCPA sobre EAc induzida ação analgésica. Superior, médio e painéis inferiores representam freqüências EAc aos 2, t0 e 100 Hz (n = 8 para cada freqüência de estimulação), respectivamente. O bar aberto representa os valores obtidos após a injeção de formalina, o bar fechado mostra os valores de lamber tempo obtido após estímulo EAc injeção de formalina +, ea barra tracejada indica os valores obtidos após pré-tratamento com PCPA (200 mg / kg, IP) antes de EAc formol + injeção. # Valores após EAc diferiu estatisticamente da injeção de formalina apenas (p <0,05). * Valores obtidos após pré-tratamento com PCPA (200 mg / kg, IP) antes da injeção de formalina EAc + diferiram daqueles obtidos após estímulo EAc injeção de formalina + (p <0,05).

Fig. 4. Efeitos de antagonistas do receptor 5-HT no EAC-analgesia. Painel superior: efeitos do antagonista receNor 5 HTIA, pin-dobind-5-HT1A (n = 8). Meio do painel: efeitos do antagonista do receptor 5-HT2, quetanserina (n = 8). efeitos Inferior: do 5-HT3antagonista do receptor, LY-278584 (n = 8). O bar aberto representa valores controle (injeção de formalina), o bar fechado indica os valores obtidos após a CAE (nas freqüências de 2, 10 ou 100 Hz) + injeção de formalina, e as eclodiram bar retrata valores obtidos socorros pré-tratamento com pindobind-5-HT1A (painel superior), quetanserina (painel do meio), ou LY-278584 (painel inferior) antes da injeção de formalina EAc +. # Valores após EAc estatisticamente diferentes das de injeção de formalina (p <0,05). * Valores obtidos após pré-tratamento com antagonistas dos receptores 5-HT antes da injeção de formalina EAc + diferiu estatisticamente daqueles obtidos após a injeção de formalina EAc + (p <0,05).

Discussão Acupuntura, um aspecto importante da medicina tradicional chinesa, tem sido associado com muitos efeitos terapêuticos. Várias teorias sobre os mecanismos da acupuntura foram recentemente propostas. Uma das hipóteses de eficácia da acupuntura é a mediação da percepção "do controle do portão" no corno dorsal da medula espinhal. Melzack e Wall [20] introduziu a "teoria do controle do portão," provas de que a estimulação de baixo limiar das fibras aferentes mielinizadas primário diminui a resposta de neurônios do corno dorsal de nociceptores unmyelinated, enquanto o bloqueio de condução nas fibras mielinizadas melhora a resposta nociceptiva de neurônios do corno dorsal. Acupuntura e estimulação elétrica nervosa transcutânea estimular Aa ou A [3 aferentes mielinizados através de uma coluna vertebral "do controle do portão 'do circuito, que suprime a nocicepção mediada por fibras amielínicas C [3, 9, 21]. No entanto, se a "teoria do controle do portão", tal como aplicada ao mecanismo da acupuntura fosse válido, então o efeito analgésico da acupuntura só ocorreria quando ambos os aferentes mielinizados estimulados pela acupuntura e nociceptiva aferentes alimentam os mesmos segmentos espinhais. A maioria das aplicações de acupuntura não aderem a esta situação, embora o circuito espinhal 'gate-control "pode contribuir parcialmente para o mecanismo. Outra hipótese relacionada com a síntese e liberação de neurotransmissores endógenos após a acupuntura afirma que uma substância endógena de opióides como isolada do cérebro de mamíferos e humanos tecido fluido cerebrospinal age como um analgésico para os receptores de opióides [12]. O efeito analgésico da acupuntura pode ser parcialmente devido à liberação de endorfinas endógenas [22]. Além disso, Chert e Han [4] elucidado como EAc com uma frequência de 2 Hz induz a secreção de [3-endorfina que actuam sobre a g e 8 receptores opióides para produzir seus efeitos analgésicos. Estes resultados acima fortemente implica que as substâncias opióides endógenos como podem mediar o efeito analgésico da acupuntura. Bilateral microinjeção de morfina no hipotálamo posterior, substância cinzenta periaquedutal, ou na área tegmental ventral provoca supressão poderoso de comportamentos nociceptivos no teste da formalina [18], e este anti-nocicepção pode depender da ativação de vias descendentes que atuam como centros no mesencephalic matéria cinzenta periaquedutal e, em seguida, no núcleo magno da rafe e núcleo reticular paragigantocellularis [7, 15, 25], que, respectivamente, implica a envolvimento dos sistemas serotoninérgico e noradrenérgico. Além disso, endógena [3-endorfina e encefalina sintetizado a partir do núcleo arqueado do hipotálamo provocou o mesmo efeito [19, 24]. Estas observações sugerem que, pelo menos, dois sistemas, substâncias endógenas neurônios monoaminérgicos e opióides, podem mediar a efeitos da EAC.

Evidências demonstram que a curva de resposta à dor induzida por 0.5o / o formol foi bifásica, consistindo de uma fase inicial e uma fase tardia. Neurotransmissores / modula-dores (ie, 5-HT, NE, substância P e bradicinina), que estão implicados em mecanismos centrais, participam na manifestação da resposta de fase precoce. Histamina, prostaglandinas e bradicinina, que estão implicados em mecanismos inflamatórios periféricos, estão envolvidas na fase final [11, 13, 27, 31, 33]. No presente estudo, verificou-se que as durações de tempo lambendo foram reduzidas nas fases precoce e tardia de pré-estimulação com EAc em Zusanli (ST36), com 2, 10 ou 100 Hz. Nós ainda farmacologicamente elucidada a participação dos serotoninérgicos sistemas de EAC-analgesia, e descobriu que a administração ICV de 5-HT reduziram a formalina induziu respostas nociceptivas em fases precoces e tardias. O resultado da administração ICV de 5-HT que imita da EAC, sugerindo que o sistema serotonérgico contribui para os mecanismos anti-nociceptivos. Tem sido documentado que a analgesia por acupuntura envolve a via descendente serotoninérgica e noradrenérgica do sistema, embora os resultados são controversos na literatura [5, 16, 28, 29, 35, 39, 40]. Aqui temos a hipótese de que EAc analgesia induzida é parcialmente mediado pela 5-HT. Nosso resultado que a depleção da 5-HT pela administração de PCPA IP em ratos atenuada EAc induzida efeito analgésico na fase inicial do teste de formalina, indica o envolvimento de 5-HT na EAC-analgesia. Quanto à resposta de fase final do teste de formalina, PCPA apresentaram um efeito sinérgico anti nocicepção com EAc independentemente da freqüência usada com EAC. Como mencionado acima, o late-resposta de fase do teste da formalina foi mediada pelo ofbradykinin mecanismos periféricos ou prostaglandina. 5-HT foi relatado para realçar o efeito periférico da bradicinina na geração de dor muscular e hiperalgesia muscular em seres humanos [1, 2]. Portanto, depleção da 5-HT pode reduzir a sensibilização dos aferentes nociceptivos, atenuando os efeitos da bradicinina ou de prostaglandina no sistema nervoso periférico.

Nós determinou ainda a participação de centrais subtipos de receptores 5-HT no EAC-analgesia. Nossos resultados mostram que a administração ICV dos respectivos 5-HT1A e antagonistas dos receptores 5-HT3, pindobind-5-HT1A ea LY-278584, bloqueou EAc induzida por efeitos anti-nociceptivos; que o antagonista do receptor 5-HT2, ketanser-in, potencializado de alta freqüência EAc induzida por ação analgésica. Estes resultados sugerem que 5-HT1A e receptores 5-HT3 mediar EAc analgesia induzida, enquanto a ativação dos receptores 5-HT2 suprime os efeitos da EAC. Essas observações são pouco coerentes com os resultados anteriores elucidadas por Takagi e [Yonehara 30]. A explicação para os resultados diferentes na fase final entre a depleção da 5-HT e antagonismo 5-HT podem ser primariamente devido a mecanismos periféricos versus central, pois nós administramos PCPA IP e injetados 5-HT antagonistas do ICV. Essa hipótese porém precisa ser mais determinado em estudos futuros. Um possível fator que interfere com o resultado da EAC decorrente nosso protocolo experimental os efeitos da restrição. Stress pode activar opióides endógenos e analgesia [8, 38]. Um período de 30 min de retenção diminuiu significativamente a duração da pata lamber, mas não teve efeito sobre a duração da elevação da pata na fase inicial, em contrapartida, este tipo de retenção reduziu a duração da elevação da pata, mas não pata lamber durante a fase final [8]. Portanto, é razoável que se preocupar analgesia induzida pelo estresse pode interagir ou potenciar mecanismos de analgesia EAC. Entretanto, relatos anteriores da literatura indicam que o estresse induzido analgesia é exibido quando o período de retenção dura pelo menos 30 chuva [8, 14]. Nossos resultados delinear que nem retenção de 5 min, nem retenção de 5 min + estimulação acupoint não alterou os efeitos nociceptiva induzida pela injeção de formalina. Esta observação sugere que a analgesia induzida por estresse, como a restrição ou a estimulação elétrica em nosso atual design experimental, não foi aditivo para analgesia do EAC-induzida. Juntos, nossos resultados sugerem que 5-HT parcialmente medeia EAc induzida efeitos analgésicos. Ambos os 5-HT1A e receptores 5-HT3 mediar EAc analgesia induzida, enquanto que a ativação de receptores 5-HT2 inibe os efeitos da EAC.

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